?有機(jī)氯測(cè)定蛋白質(zhì)的兩種主要方法包括Lowry法和Biuret法。?具體內(nèi)容如下所示：

1.Lowry法

Lowry法是一種經(jīng)典的蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法，基于酪氨酸和苯釕環(huán)的堿性條件下的氧化反應(yīng)。具體步驟如下：

①將待測(cè)樣品與堿性染料（如費(fèi)羅菲定）發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)。

②添加硫酸和焦磷酸銨將蛋白質(zhì)沉淀。

③用乙醇洗滌沉淀，形成可溶的復(fù)合物。

④測(cè)量復(fù)合物在750nm波長(zhǎng)處的光吸收度，其值與蛋白質(zhì)含量成正比?。

?Lowry法?的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，缺點(diǎn)是反應(yīng)耗時(shí)長(zhǎng)，且易受表面活性劑、螯合物和硫醇還原劑的影響。

2.Biuret法

Biuret法通過(guò)檢測(cè)在堿性條件下蛋白質(zhì)與銅離子發(fā)生的絡(luò)合反應(yīng)來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)含量。具體步驟如下：

①將蛋白質(zhì)樣品與堿性染料溶液（如雙縮脲試劑）混合，形成藍(lán)色絡(luò)合物。

②加入硫酸銅溶液，絡(luò)合物轉(zhuǎn)變?yōu)樽仙j(luò)合物。

③在560nm波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度，用于定量測(cè)定蛋白質(zhì)含量?。

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?Biuret法?的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，缺點(diǎn)是測(cè)量范圍較窄，通常用于0.5g/L～10g/L含量的蛋白質(zhì)溶液測(cè)定?。

需要注意的是這兩種方法的選擇取決于實(shí)驗(yàn)條件、樣品性質(zhì)以及所需精度等因素。

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